세인트존스워트80%메탄올건조엑스 St. John's Wort 80% Methanol Dry Extract
이 약은 세인트존스워트 (St. John's Wort, 유럽약전) 를 80 % 메탄올로 추출한 건조엑스로서, 정량할 때 총 히페리신 [슈도히페리신 (C 30 H 16 O 9 : 520.43) 및 히페리신 (C 30 H 16 O 8 : 504.43)으로서] 0.12 ～ 0.28 %를 함유한다.
제 법
이 약은 Hyperici perforatum L.(물레나물과 Hypericaceae)의 개화기 지상부(St. John's Wort, 유럽약전) 를 분쇄하여 80 % 메탄올로 1 시간동안 2 회 침출하고 여과하여 침출액을 15 ℃ 이하로 식힌 다음 고속원심분리기로 침출액을 여과한다. 수지에 흡착하고 80 % 메탄올로 용출한 다음 50 ℃ 이하에서 감압건조 후 멸균하여 분말화(80 mesh)한 다음 여과한다.
성 상
이 약은 어두운 갈색의 가루이다.
확인시험
1) 이 약 1 g을 달아 메탄올을 넣어 20 mL로 하고 흔들어 섞어 추출한 다음 여과한 여액을 검액으로 한다. 따로 히페리신 표준품 10 mg을 달아 메탄올에 녹여 50 mL로 하여 표준액 A로 한다. 따로 따로 「세인트존스워트80%메탄올건조엑 스」 1 g을 달아 메탄올을 넣어 20 mL로 하여 표준액 B로 한다. 검액 및 각 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판 (형광제 첨가)에 점적한다. 다음에 아세트산에틸ㆍ물ㆍ포름산혼합액(5 : 4 : 1)의 상층액을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 약 105 ℃에서 50 분간 가열하고 여기에 1 % diphenylboric acid β-aminoethylester 메탄올용액를 뿌린 다음 5 % 폴리에틸렌글리콜 400 에탄올용액을 고르게 뿌리고, 자외선 (365 nm)를 쪼일 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 R f 값은 같다.
2) 정량법에 따라 시험할 때 검액과 표준액은 같은 유지시간에서 피크를 나타낸다.
pH
이 약을 50 % 에탄올로 녹인 5 % 용액의 pH는 4.0 ～ 6.0이다.
순도시험
1) 중금속 총 중금속 30 ppm 이하
2) 잔류농약 가) 총 디디티(p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) 0.1 ppm 이하
나) 디엘드린 0.01 ppm 이하
다) 총 비에이치씨(α,β,γ 및 δ-BHC의 합계) 0.2 ppm 이하
라) 알드린 0.01 ppm 이하
마) 엔드린 0.01 ppm 이하
건조감량
12.0 % 이하 (105 ℃, 15시간)
회 분
8.0 % 이하 (1 g)
미생물한도
시험할 때 적합하다.
정 량 법
이 약 약 125 mg을 정밀하게 달아 25 mL 용량플라스크에 넣고 메탄올 20 mL를 넣어 1 시간동안 초음파추출한 다음 실온에서 식힌다. 메탄올을 넣어 정확하게 25 mL로 하고 원심분리한 상층액을 250 W/m 2 의 광원으로 8 분 동안 쪼인 다음 검액으로 한다. 따로 히페리신 표준품 약 4.5 mg을 정밀하게 달아 메탄올에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준원액으로 한다(히페리신 약 0.09 mg/mL). 이 액 일정량을 정확하게 달아 메탄올을 넣어 히페리신 0.003 ～ 0.045 mg/mL 농도범위의 액을 만들어 검량선용 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 다음 조건에서 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 표준액에서 얻은 검량선을 써서 검액 중 총 히페리신 (히페리신 및 슈도히페리신)의 양 (mg/mL)을 구한다.
총히페리신의 함량(%)
= 2500 ×
C : 검액 중 총히페리신(히페리신 및 슈도히페리신)의 농도(mg/mL)
W : 검액 중 세인트존스워트80%메탄올엑스의 무게 (mg)
조작조건
칼 럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 15 cm의 스테인레스관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화된 실리카겔을 충전한다.
칼럼온도 : 30 ℃
검출기 : 자외부흡광광도계 (590 nm)
이동상 : 메탄올․인산염완충액(pH 2.1) 1) ․아세트산에틸 (800 : 206 : 195)
유 속 : 1.0 mL/분
1) 인산염완충액(pH 2.1) : 인산이수소나트륨 15.6 g을 물에 녹여 1 L로 한 다음 인산으로 pH 2.1로 조정한다.
저 장 법
기밀용기.