밀크시슬열매건조엑스 Milk-thistle Fruit Dry Extract
Milk Thistle Dry Extract
이 약은 정량할 때 표시량의 90.0 ～ 110.0 %에 해당하는 실리마린 [실리빈 (C 25 H 22 O 10 : 482.40)으로]을 함유한다. 실리마린 표시량은 건조한 밀크시슬엑스의 30.0 ～ 65.0 %에 해당한다. (단, 실리마린의 함량 중 실리디아닌 (C 25 H 22 O 10 : 482.40) 및 실리크리스틴 (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합은 20.0 ～ 45.0 %, 실리빈 A (C 25 H 22 O 10 : 482.40) 및 실리빈 B (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합 : 40.0 ～ 65.0 %, 이소실리빈 A (C 25 H 22 O 10 : 482.40) 및 이소실리빈 B (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합 : 10.0 ～ 20.0 %이어야 한다.)
제 법
이 약은 Silybum marianum L. (국화과 Compositae)의 잘 익은 열매 (Milk Thistle Fruit, 유럽약전) 를 가지고 적당한 유기용매 (아세트산에틸, 아세톤, 아세톤과 물 혼합액, 에탄올, 에탄올과 물 혼합액, 메탄올, 메탄올과 물 혼합액)로 추출하여 엑스제의 제법에 따라 제조한다.
성 상
이 약은 미황색 ～ 갈색의 무정형의 가루이다.
확인시험
1) 이 약 250 mg을 달아 메탄올 5 mL에 흔들어 섞어 녹여 검액으로 한다. 검액은 사용 전에 최소한 15 분간 방치한다. 따로 실리빈 표준품 2 mg 및 탁시폴린 표준품 5 mg을 달아 각각 메탄올 10 mL에 녹여 표준액 (1) 및 표준액 (2)로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 디클로로메탄․아세톤․포름산혼합액(150 : 33 : 17)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 100 ～ 105 ℃에서 말린다. 여기에 1 % 메탄올성 디페닐붕산 2-아미노에틸에스테르용액을 뿌리고, 5 % 메탄올성 PEG 400 용액을 뿌린 다음 자외선 (주파장 365 nm)을 쪼일 때 검액 및 표준액에서 얻은 실리빈 반점의 R f 값과 연녹색의 형광이 같고, 검액은 실리빈 반점 위쪽에서 비교적 약하게 형광을 발하는 영역이 나타난다. 검액 및 표준액에서 얻은 탁시폴린 반점의 R f 값과 황갈색 형광은 같고, 검액은 탁시폴린 아래쪽에 연녹색의 형광을 발하는 반점 (실리크리스틴)이 나타난다.
2) 이 약을 가지고 정량법에 따라 시험할 때 검액은 실리크리스틴, 실리디아닌, 실리빈 A, 실리빈 B, 이소실리빈 A 및 이소실리빈 B의 순서로 피크가 나타난다.
순도시험
1) 중금속 총 중금속 30 ppm 이하
2) 잔류농약 가) 총 디디티(p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) 0.1 ppm 이하
나) 디엘드린 0.01 ppm 이하
다) 총 비에이치씨(α,β,γ 및 δ-BHC의 합계) 0.2 ppm 이하
라) 알드린 0.01 ppm 이하
마) 엔드린 0.01 ppm 이하
건조감량
5.0 % 이하 (1 ｇ, 105 ℃, 2 시간)
강열잔분
1.0 % 이하 (1.0 ｇ)
미생물한도
시험할 때 적합하다.
정 량 법
이 약 약 60.0 mg을 정밀하게 달아 메탄올 90 mL를 넣어 20 분간 초음파추출한 다음 20 ℃로 식히고 여과하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 실리빈 표준품 (미리 실리카겔데시케이터에서 24시간 건조한다.) 약 10.0 mg 및 실리빈 약 10.0 mg에 해당하는 밀크시슬엑스 을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 각각 표준액 및 밀크시슬엑스 대조액으로 한다. 검액, 표준액 및 대조액 10 μL씩을 가지고 다음 조건에서 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 밀크시슬엑스 대조액에서 확인한 실리크리스틴, 실리디아닌, 실리빈 A, 실리빈 B, 이소실리빈 A 및 이소실리빈 B의 피크를 통해 검액 및 표준액의 피크면적을 측정한다.
실리마린 [실리빈 (C 25 H 22 O 10 )으로]의 양 (%)
= × 100
실리크리스틴 (C 25 H 22 O 10 ) 및 실리디아닌 (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
실리빈 A (C 25 H 22 O 10 ) 및 실리빈 B (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
이소실리빈 A (C 25 H 22 O 10 ) 및 이소실리빈 B (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
F 1 = 검액의 실리크리스틴 피크면적
F 2 = 검액의 실리디아닌 피크면적
F 3 = 검액의 실리빈 A 피크면적
F 4 = 검액의 실리빈 B 피크면적
F 5 = 검액의 이소실리빈 A 피크면적
F 6 = 검액의 이소실리빈 B 피크면적
F 7 = 표준액의 실리빈 A 피크면적
F 8 = 표준액의 실리빈 B 피크면적
m 1 = 실리빈 표준품 무게 (g)
m 2 = 검액의 밀크시슬엑스 무게 (g)
조작조건
칼 럼 : 안지름 약 4 ～ 6 mm, 길이 12 ～ 25 cm의 스테인레스관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화된 실리카겔을 충전한다.
검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 288 nm)
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 물․메탄올․85% 인산용액 (130 : 70 : 1)
이동상 B - 물․메탄올․85 % 인산용액 (100 : 100 : 1)
| 시간(분) | 이동상A(vol%) | 이동상B(vol%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 28 | 0 | 100 |
| 35 | 0 | 100 |
| 36 | 100 | 0 |
유 속 : 0.8 mL/분
주입량 : 10 μL
시스템적합성 : 최소 1.8 분 (두 주피크들 실리빈 A와 실리빈 B 사이의 유지시간 차이). 실리빈 B의 유지시간은 약 30 분은 되어야한다. 꼭 필요하면 이동상의 농도구배를 변경한다.
저 장 법
차광한 기밀용기.