밀크시슬열매건조엑스 정 Milk-thistle Fruit Dry Extract Tablets
이 약은 정량할 때 표시량의 90.0 ～110.0 %에 해당하는 실리마린 [실리빈 (C 25 H 22 O 10 : 482.40)으로]을 함유한다. (단, 실리마린의 함량 중 실리디아닌 (C 25 H 2 O 10 : 482.40) 및 실리크리스틴 (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합은 20.0 ～ 45.0 %, 실리빈 A (C 25 H 22 O 10 : 482.40) 및 실리빈 B (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합 : 40.0 ～ 65.0 %, 이소실리빈 A (C 25 H 22 O 10 : 482.40) 및 이소실리빈 B (C 25 H 22 O 10 : 482.40)의 합 : 10.0 ～ 20.0 %이어야 한다.)
제 법
이 약은 밀크시슬엑스를 가지고 정제의 제법에 따라 만든다.
확인시험
1) 이 약 20 정 이상을 가지고 밀크시슬엑스 약 30 mg에 해당하는 양을 달아 메탄올 10 mL에 흔들어 섞고 10 분간 초음파추출한 다음 검액으로 한다. 검액은 사용 전에 최소한 15 분간 방치한다. 따로 밀크시슬엑스 30 mg을 달아 메탄올 10 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 실리카겔을 써서 만든 박층판 (형광제 첨가)에 점적한다. 다음에 디클로로메탄․아세톤․포름산혼합액(150 : 33 : 17)을 전개용매로 하여 10 cm 전개한 다음 박층판을 100 ～ 105 ℃에 말린다. 여기에 1 % 메탄올성 디페닐붕산 2-아미노에틸에스테르용액을 뿌리고, 5 % 메탄올성 PEG 400 용액을 뿌린 다음 자외선 (주파장 365 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다.
2) 이 약을 가지고 정량법에 따라 시험할 때 검액은 실리크리스틴, 실리디아닌, 실리빈 A, 실리빈 B, 이소실리빈 A 및 이소실리빈 B의 순서로 피크가 나타난다.
순도시험
중금속 가) 총 중금속 30 ppm 이하
나) 납 5 ppm 이하
다) 비소 3 ppm 이하
붕해시험
시험할 때 적합하다.
질량편차시험
시험할 때 적합하다.
미생물한도
시험할 때 적합하다.
정 량 법
이 약 20 정 이상을 가지고 그 무게를 정밀하게 달아 가루로 한 다음 실리마린으로서 약 100.0 mg에 해당하는 양을 정밀하게 달아 메탄올 90 mL를 넣어 20 분 동안 초음파추출한 다음 20 ℃로 식히고 여과하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 실리빈 표준품(미리 실리카겔데시케이터에서 24시간 건조한다.) 약 10 mg 및 실리빈 약 10.0 mg에 해당하는 밀크시슬엑스를 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 각각 표준액 및 밀크시슬엑스 대조액으로 한다. 검액, 표준액 및 대조액 10 μL를 가지고 다음 조건에서 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 밀크시슬엑스 대조액에서 확인한 실리크리스틴, 실리디아닌, 실리빈 A, 실리빈 B, 이소실리빈 A 및 이소실리빈 B의 피크를 통해 검액, 대조액 및 표준액의 피크면적을 측정한다.
○ 대조품 : 자사에서 제조시 사용한 밀크시슬엑스 원료.
실리마린 [실리빈 (C 25 H 22 O 10 )으로]의 양 (%)
= × 100
실리크리스틴 (C 25 H 22 O 10 ) 및 실리디아닌 (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
실리빈 A (C 25 H 22 O 10 ) 및 실리빈 B (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
이소실리빈 A (C 25 H 22 O 10 ) 및 이소실리빈 B (C 25 H 22 O 10 )의 양 (%)
= × 100
F 1 = 검액의 실리크리스틴 피크면적
F 2 = 검액의 실리디아닌 피크면적
F 3 = 검액의 실리빈 A 피크면적
F 4 = 검액의 실리빈 B 피크면적
F 5 = 검액의 이소실리빈 A 피크면적
F 6 = 검액의 이소실리빈 B 피크면적
F 7 = 표준액의 실리빈 A 피크면적
F 8 = 표준액의 실리빈 B 피크면적
m 1 = 실리빈 표준품 무게 (g)
m 2 = 밀크시슬엑스 엑스 무게 (g)
조작조건
칼 럼 : 안지름 약 4 ～ 6 mm, 길이 12 ～ 25 cm의 스테인레스관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화된 실리카겔을 충전한다.
검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 288 nm)
이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.
이동상 A - 물․메탄올․85 % 인산용액(130 : 70 : 1)
이동상 B - 물․메탄올․85 % 인산용액(100 : 100 : 1)
| 시간(분) | 이동상A(vol%) | 이동상B(vol%) |
| 0 | 100 | 0 |
| 28 | 0 | 100 |
| 35 | 0 | 100 |
| 36 | 100 | 0 |
유 속 : 0.8 mL/분
주입량 : 10 μL
시스템적합성 : 최소 1.8 분(두 주피크들 실리빈 A와 실리빈 B 사이의 유지시간 차이). 실리빈 B의 유지시간은 약 30 분은 되어야 한다. 꼭 필요하면 이동상의 농도구배를 변경한다.
저 장 법
차광한 기밀용기.