옥수수불검화정량추출물 Titrated Extract of Zea Mays L. Unsaponifiable Fraction
이 약은 Zea Mays L.을 압착하여 얻은 지방을 검화하여 얻은 죽상물질이다. 이 약은 정량할 때 총 스테롤 (β-시토스테롤 (C 29 H 50 O : 414.69)로서) 10.0 ～ 25.0 %, 불검화물 75.0 % 이상을 함유한다.
성 상
이 약은 암갈색의 특유한 냄새가 나는 점조성 엑스이다. 이 약은 에테르, 석유에테르, 아세트산에틸, 클로로포름 및 95 % 에탄올에 녹고 물에는 현탁이 된다.
확인시험
이 약의 0.5 % 클로로포름용액을 검액으로 한다. 따로 β-시토스테롤 표준품 0.1 % 클로로포름용액을 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액과 표준액 20 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 시클로헥산․아세트산에틸혼합액(6 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 바람에 말린다. 여기에 아세트산(100)․황산혼합액(9 : 1)을 고르게 뿌린 다음 105 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점 중 1개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다.
순도시험
1) 중금속 총 중금속 30 ppm 이하
2) 잔류농약 가) 총 디디티(p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) 0.1 ppm 이하
나) 디엘드린 0.01 ppm 이하
다) 총 비에이치씨(α,β,γ 및 δ-BHC의 합계) 0.2 ppm 이하
라) 알드린 0.01 ppm 이하
마) 엔드린 0.01 ppm 이하
산 가
20 이하
이 약 약 0.5 g을 정밀하게 달아 250 mL 용량플라스크에 넣고 95% 에탄올․에테르혼합액(1 : 1) 100 mL를 넣고 녹여 티몰블루시액을 지시약으로 0.1 mol/L 수산화나트륨 용액으로 적정한다.
0.1 mol/L 수산화나트륨 1 mL = 5.611 mg 수산화칼륨
산가 =
미생물한도
시험할 때 적합하다.
정 량 법
1) 총 스테롤 (β-시토스테롤로서)
표준원액 β-시토스테롤 표준품 20 mg을 정밀하게 달아 100 mL 용량플라스크에 넣고 에탄올에 녹여 100 mL로 한다(초음파 추출 5 분).
표 준 액 다음의 표와 같이 표준원액과 효소발색액 주1) 을 각각 넣고 37 ℃ 수욕 상에서 5 분간 방치한 다음 에탄올을 넣고 실온에서 10 분간 방치한다.
| 농도(mg/mL) | 표준원액(μL) | 효소발색액(mL) | 에탄올(μL) |
| Blank | 0 | 3 | 1000 |
| 0.04 | 200 | 3 | 800 |
| 0.06 | 300 | 3 | 700 |
| 0.08 | 400 | 3 | 600 |
주1) 효소발색액 : 시판되는 “콜레스테자임-V에이켄 주2) ”을 사용한다.
주2) 키트조성 100회분 중
① 효소시약 ‘에이켄’․․․․․․․․․․105 mL, 3 병
1 병 중
콜레스테롤 에스테라제 9 단위
콜레스테롤 옥시다제 17.5 단위
퍼옥시다제 50 단위
4-아미노 안티피린 6.4 mg
② 콜레스테롤 표준액 ‘에이켄’․․․․․105 mL, 1 병
콜레스테롤 300 mg/dL 상당량 함유
③ 발색시약 ‘에이켄’․․․․․․․․․ 105 mL, 3병
검 액 이 약을 가루로 하여 β-시토스테롤로서 20 mg 해당량을 정밀하게 달아 100 mL 용량플라스크에 넣고 에탄올로 녹여 100 mL로 한다 (초음파 처리 5분). 냉장고에 50 분 정도 방치시킨 다음 이 액을 멤브레인여과지 (0.45μm)로 여과한다. 여액 300 μL에 효소시액 3 mL를 넣고 37 ℃ 수욕에서 5 분간 방치한 다음 에탄올 700 μL를 넣고 실온에서 10 분간 방치한다.
조 작 위 표준액과 검액을 조제한 다음 60 분 이내에 파장 500 nm에서 각각 흡광도를 측정하고 표준액의 검량선을 작성한 다음 검액의 흡광도로 검량선상의 검액의 농도를 구한다.
2) 불검화물 이 약 약 150 mg을 정밀하게 달아 2 mol/L 에탄올성수산화칼륨용액 50 mL를 넣고 환류냉각기를 달고 1 시간동안 가열한 다음 물 50 mL를 넣고 흔들어 추출한다. 석유에테르 50 mL를 넣고 흔들어 추출한 다음 석유에테르층을 모으고 수층은 다시 석유에테르 50 mL를 넣어 3 회 반복추출한다. 석유에테르층을 모두 모으고 50 % 메탄올 50 mL씩으로 4 회 세척한 다음 석유에테르층을 중량을 미리 단 증류플라스크에 옮기고 감압하여 증류한다. 증류가 끝나면 100 ℃ 건조기에서 항량이 될 때까지 건조한 다음 실리카겔 데시케이터에서 냉각하고 질량을 정밀하게 달아 불검화물의 양을 측정한다.
저 장 법
기밀용기.