대한민국약전외한약(생약)규격집 (2020. 8. 25. 일부개정)

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평위산연․건조엑스 Pyeongwisan Soft․Dry Extract

2020. 9. 25 오후 1:46

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1.0 g을 가지고 진피 중 헤스페리딘 (C 28 H 34 O 15 : 610.56) 5.9 mg 및 감초 중 글리시리진산 (C 42 H 62 O 16 : 822.93) 2.5 mg 이상을 함유한다.

제 법

1 회 량 중

창 출 1.33 g

후 박 1.00 g

진 피 1.00 g

대 추 0.67 g

감 초 0.33 g

건 강 0.33 g

위의 생약을 정선하여 약전 통칙 중 절도에 따라 조절로 한 다음 원료약품의 분량대로 각 생약을 달아 추출기에 넣고 8 ～ 10 배량의 「상수」 또는 「정제수」를 넣어 80 ～ 100 ℃에서 2 ～ 3 시간 추출하여 추출액을 여과하고 여액을 60 ℃ 이하에서 감압농축하여 연조엑스 1.19 ～ 1.79 g 또는 적당한 방법으로 건조한 건조엑스 0.68 ～ 1.02 g을 얻는다.

확인시험

(제 1 법) 또는 (제 2 법) 또는 (제 3 법)을 실시한다.

(제 1 법) 1) 창출 이 약을 가지고 창출로서 약 1 g에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물 10 mL를 넣고 5 분간 흔들어 섞은 다음 메탄올 100 mL를 넣고 환류냉각기를 달고 1 시간 가열한 다음 여과한다. 여액을 감압농축하여 5 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 ｢창출｣ 가루 약 1 g을 달아 메탄올 100 mL 을 넣고 환류냉각기를 달고 1 시간 가열한 다음 여과한다. 여액을 감압농축하여 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 실리카겔 GF 254 로 만든 박층판에 점적하여 클로로포름・메탄올 (10 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 4-메톡시벤즈알데히드․황산시액 을 고르게 뿌릴 때 검액과 표준액은 같은 R f 값에서 같은 색상의 반점을 나타낸다.

2) 후박 이 약을 가지고 후박 약 1 g에 해당하는 양을 달아 물 5 mL를 넣고 5 분간 흔들어 섞은 다음 메탄올 10 mL를 넣고 30분간 초음파 추출한 다음 여과하여 검액으로 한다. 따로 호노키올표준품 1 mg을 달아 메탄올 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 uL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 헥산･아세트산에틸혼합액(2 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선 (주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점 중 1개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다.

3) 진피 이 약을 가지고 진피 약 1 g에 해당하는 양을 달아 물 5 mL를 넣고 5 분간 흔들어 섞은 다음 메탄올 10 mL를 넣고 30분간 초음파 추출한 다음 여과하여 검액으로 한다. 따로 헤스페리딘표준품 1 mg을 달아 메탄올 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 uL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산에틸･메탄올･물･아세트산혼합액(13 : 3 : 3 : 2)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선 (주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점 중 1개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다

4) 대추 이 약을 가지고 생약시험법 중 대추 확인시험법에 따라 시험한다.

5) 감초 이 약을 가지고 감초 약 1 g에 해당하는 양을 달아 물 5 mL를 넣고 5 분간 흔들어 섞은 다음 메탄올 10 mL를 넣고 30분간 초음파 추출한 다음 여과하여 검액으로 한다. 따로 글리시리진산표준품 1 mg을 달아 메탄올 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 uL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산에틸･메탄올･물･포름산혼합액(15 : 2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선 (주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점 중 1개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다.

6) 건강 이 약을 가지고 건강 약 1 g에 해당하는 양을 달아 물 10 mL를 넣고 5분간 흔들어 섞은 다음 디에틸에테르 25 mL을 넣어 30분간 초음파 추출한 다음 여과한다. 여액 중 디에틸에테르층을 취하여 감압농축하고 디에틸에테르 2 mL에 녹여 검액으로 한다. 따로 6-징게롤표준품 1 mg을 달아 메탄올 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 uL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 헥산･아세트산에틸혼합액(1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 4-디메틸아미노벤즈알데히드 시액을 고르게 뿌린 다음 105 ℃에서 가열할 때 검액에서 얻은 여러 개의 반점 중 1개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 색상 및 R f 값이 같다.

(제 2 법) 1) 진피, 감초 정량법에 따라 시험할 때 검액은 표준액과 같은 머무름시간에서 피크가 나타난다.

2) 창출, 후박, 건강 (제 1 법)에 따라 시험한다.

3) 대추 이 약을 가지고 생약시험법 중 대추 확인시험법에 따라 시험한다.

(제 3 법) 1) 후박, 진피, 감초 및 건강 이 약 약 1 g을 달아 50 % 메탄올 10 mL를 넣고 30분간 초음파 추출한 다음 여과하여 검액으로 한다. 따로 헤스페리딘표준품 5 mg을 달아 메탄올을 넣어 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 uL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험할 때 표준액과 같은 머무름시간에서 피크를 나타내고, 그림과 같이 헤스페리딘표준액과 비교하여 상대머무름 시간을 나타낸다.

 

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm, 250 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4 ～ 6 ㎜, 길이 15 ～ 25 ㎝인 스테인레스강판에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A - 아세토니트릴

 

시간(분) 이동상 A (vol%) 이동상 B (vol%)
0 20 90
15 25 75
28 45 55
36 65 35
45 100 0

이동상 B - 0.03% 인산액

 

유 량 : 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 검액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 각각의 피크가 완전하게 분리되도록 농도구배조건을 조정한다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL씩을 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 헤스페리딘 피크면적에 대한 상대표준편차는 2.0 % 이하이다. 또한, 헤스페리딘의 머무름시간에 대하여 주요 성분의 상대머무름시간은 다음의 표와 같이 확인되어야 한다.

 

  성분 상대머무름시간
① 헤스페리딘 1.00
② 글리시리진산 2.16
③ 6-징게롤 2.47
④ 호노키올 2.79

 

(검출파장 : 210 nm)

(검출파장 : 250 nm)

① 헤스페리딘, ② 글리시리진산, ③ 6-징게롤, ④ 호노키올

 

2) 창출 (제 1 법)에 따라 시험한다.

3) 대추 이 약을 가지고 생약시험법 중 대추 확인시험법에 따라 시험한다.

순도시험

1) 중금속 총 중금속 30 ppm 이하

2) 잔류농약 가) 총 디디티(p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) 0.1 ppm 이하

나) 디엘드린 0.01 ppm 이하

다) 총 비에이치씨(α,β,γ 및 δ-BHC의 합계) 0.2 ppm 이하

라) 알드린 0.01 ppm 이하

마) 엔드린 0.01 ppm 이하

건조감량

51.6 % 이하 (연조엑스에 한한다)

미생물한도

시험할 때 적합하다.

정 량 법

(제 1 법) 또는 (제 2 법)을 실시한다.

(제 1 법) 1) 진피 중 헤스페리딘 이 약 약 1 g을 정밀하게 달아 이하 생약시험법 중 진피 정량법에 따라 시험한다.

2) 감초 중 글리시리진산 이 약 약 1 g을 정밀하게 달아 이하 생약시험법 중 감초 정량법에 따라 시험한다.

(제 2 법) 진피 중 헤스페리딘 및 감초 중 글리시리진산 이 약 약 1 g을 정밀하게 달아 헤스페리딘과 글리시리진산으로서 약 10 mg에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물 10 mL를 넣고 5분간 흔들어 섞은 다음, 메탄올 100 mL를 넣고 환류냉각기를 달아 1 시간 환류추출한 다음 상층액을 취하여 여과한다. 잔류물에 메탄올 100 mL를 넣어 반복추출한 다음 여액을 모두 모아 감압농축하여 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 헤스페리딘 표준품과 글리시리진산 표준품 약 10mg을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토크래프법에 따라 시험하여 헤스페리딘과 글리시리진산의 피크면적 A T 및 A S 를 측정한다.

 

헤스페리딘의 함량

= 헤스페리딘 표준품의 양 (mg)

글리시리진산의 함량

= 글리시리진산 표준품의 양 (mg)

 

조작조건

검출기 : 자외부흡광도계 (측정파장 230 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4 ～ 6 mm, 길이 15 ～ 25cm인 스테인레스강관에 5 ～ 10μm의 옥타데실실릴화한실리카겔을 충전한다.

이동상 :

 

시간(분) 아세토니트릴(%) 0.03 %인산액(pH 2.30)(%)
0 ～ 15 10 → 20 90 → 80
15 ～ 28 20 → 40 80 → 60
28 ～ 36 40 → 75 60 → 25
36 ～ 38 75 → 10 25 → 90
38 ～ 40 10 → 10 90 → 90

유 속 : 1.0 mL/분

저 장 법

기밀용기.