웅담
1) 우르소데옥시콜린산 정량 이 약을 가루로 하여 우르소데옥시콜린산으로 약 50 mg 해당량을 정밀하게 달아 메탄올 30 mL로 1 시간씩 수욕에서 3 회 환류추출하여 여과한다. 여액을 증발건고하고 잔류물에 석유에테르 20 mL 넣어 1 시간씩 3 회 환류추출하고 여과한다. 잔류물에 2.5 mol/L 수산화나트륨 10 mL를 넣어 밀봉하고 고압멸균기에서 (온도 120 ℃, 압력 1 kg/cm²) 4 시간 가수분해 한 다음 실온에 방치 냉각하고 여과한다. 여액을 합하고 묽은염산으로 pH를 1로 조절한 다음 아세트산에틸 20 mL로 3 회 추출한다. 아세트산에틸층을 증발건고하고 잔류물을 메탄올에 녹여 정확하게 10 mL로 한 다음 여과하여 검액으로 한다. 따로 우르소데옥시콜린산 표준품 약 50 mg을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 녹여 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 우르소데옥시콜린산 피크면적 A T 및 A S 를 측정한다.
우르소데옥시콜린산 (C 24 H 40 O 4 )의 양(mg)
= 우르소데옥시콜린산 표준품의 양(mg)
조작조건
검출기 : 시차율굴절계
칼 럼 : 안지름 3.9 mm, 길이 30 cm인 스테인레스관에 10 μm의 옥타데실실릴화한실리카겔이 충전된 칼럼
이동상 : 40 % 아세토니트릴ㆍ아세트산(31)혼합액(100 : 1)
유 량 : 1.0 mL/분
2) 타우로우르소데옥시콜린산 정량 이 약을 가루로 하여 타우로우르소테스옥시콜린산으로서 약 10 mg에 해당하는 양을 정밀하게 달아 넣고 0.01 mol/L 염산용액 25 mL를 넣어 50 ℃에서 30 분간 초음파추출한다. 이 액을 방냉한 다음 5 분간 원심분리하여 상층액을 취하고, 잔류물을 0.01 mol/L 염산용액으로 세척하여 여과한 여액을 합한 다음 Sep-pak C18를 2 개 연결하여 전개시킨다(전개속도 : 10 mL/min). 인산으로 pH를 2.5로 맞춘 58 % 메탄올 8 mL로 Sep-pak C18 카트리지를 세척한 다음(전개속도 : 5 mL/min) 메탄올 3 mL로 용출시킨다(용출속도 : 2 mL/min). 따로 타우로우르소데옥시콜린산 표준품 약 10 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산용액 25 mL에 녹여 30 분간 초음파추출한 다음 메탄올을 넣어 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액과 표준액을 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각액의 타우로우르소데옥시콜린산의 피크면적 A T 및 A S 를 측정한다.
타우로우루소데옥시콜린산 (C 26 H 45 NO 6 S)의 양(mg)
= 타우로우르소데옥시콜린산 표준품의 양(mg)
조작조건
검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 205 nm)
칼 럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스관에 10 μm의 옥타데실실릴화한실리카겔이 충전된 칼럼
이동상 : 0.1 mol/L 인산이수소칼륨용액ㆍ아세토니트릴ㆍ메탄올혼합액(33 : 15 : 2)을 인산(85 %)으로 pH를 2.5로 맞춘다.
유 량 : 1.7 mL/분